果糖：是一種單糖，天然存在于水果、蜂蜜中，甜度高于葡萄糖，是構(gòu)成蔗糖的一部分。在食品工業(yè)中常用作甜味劑。
葡萄糖：也是單糖，是生物體內(nèi)能量的主要來(lái)源，廣泛存在于植物和動(dòng)物體內(nèi)。作為血糖的主要成分，對(duì)維持生命活動(dòng)至關(guān)重要。
蔗糖：由一分子葡萄糖和一分子果糖通過(guò)糖苷鍵連接而成，是最常見(jiàn)的食糖形式，廣泛用于食品甜味劑。
麥芽糖：由兩分子葡萄糖組成，是淀粉部分水解的產(chǎn)物，常見(jiàn)于麥芽和某些發(fā)酵食品中，也用作甜味劑和發(fā)酵原料。
乳糖：存在于哺乳動(dòng)物乳汁中，由一分子葡萄糖和一分子半乳糖組成，有些人因缺乏乳糖酶而不能有效消化乳糖，會(huì)出現(xiàn)乳糖不耐癥。
木糖：屬于五碳糖（戊糖），存在于某些植物中，如木質(zhì)部，是一種低熱量的甜味劑，有時(shí)用于特殊食品和飲料中。
半乳糖：?jiǎn)翁牵侨樘堑慕M成部分，也可以作為單獨(dú)的糖存在于某些糖醇和寡糖中，對(duì)嬰幼兒成長(zhǎng)發(fā)育很重要。
棉子糖：一種三糖，由葡萄糖、果糖和半乳糖組成，屬于功能性低聚糖，作為益生元可促進(jìn)腸道健康，常見(jiàn)于豆科植物中。
水蘇糖：也是一種三糖，結(jié)構(gòu)與棉子糖類似，但以半乳糖代替了棉子糖中的果糖，同樣具有益生元特性，促進(jìn)腸道有益菌群生長(zhǎng)。
山梨醇：屬于糖醇，廣泛用作食品添加劑，具有較低的熱量和不會(huì)引起顯著血糖升高的特性，作為甜味劑在糖尿病食品中很受歡迎，也用作保濕劑和防凍劑。
檢測(cè)指標(biāo)
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指標(biāo)
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方法
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標(biāo)準(zhǔn)
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用量/g
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樣品要求
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果糖
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高效液相色譜法
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GB 5009.8-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測(cè)定
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鮮樣
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葡萄糖
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蔗糖
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麥芽糖
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乳糖
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木糖
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半乳糖
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棉子糖
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水蘇糖
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山梨醇
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基本原理
高效液相色譜法（HPLC）是一種用于分離、鑒定和定量液體中半揮發(fā)和不揮發(fā)化合物的分析技術(shù)。在糖組分的檢測(cè)中，HPLC能夠通過(guò)特定的色譜柱將復(fù)雜的混合物中的單糖進(jìn)行分離，并通過(guò)檢測(cè)器對(duì)分離后的單糖進(jìn)行定性和定量分析。色譜柱的選擇、流動(dòng)相的組成和pH值、柱溫等是影響分離效果的關(guān)鍵因素。通過(guò)調(diào)整這些參數(shù)，可以提高單糖的分離度和檢測(cè)靈敏度，從而提高分析的準(zhǔn)確性和可靠性。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
HPLC在糖組分檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)在于其高分離效率、快速分析速度、高靈敏度以及良好的重復(fù)性。與其他檢測(cè)方法相比，HPLC還具有更高的分辨率和更廣的適用范圍，使其成為單糖檢測(cè)中的首選方法。此外，HPLC的操作相對(duì)簡(jiǎn)單，可以減少樣品前處理過(guò)程中可能導(dǎo)致的單糖損失或修飾，從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。
流程概述
樣品前處理
提取：根據(jù)樣品類型，使用合適的溶劑和方法提取糖分。例如，食品樣品可能需要酸水解或酶解來(lái)釋放糖分。
凈化：通過(guò)固相萃取（Solid Phase Extraction, SPE）或凝膠滲透色譜（Gel Permeation Chromatography, GPC）等方法去除樣品中的雜質(zhì)，提高糖類的純度。
衍生化（可選）：對(duì)于某些糖類，如單糖，可能需要進(jìn)行衍生化處理，以便在HPLC上獲得更好的分離和檢測(cè)效果。
高效液相色譜分析
色譜柱選擇：根據(jù)待分析糖類的性質(zhì)選擇合適的色譜柱，如反相柱、離子交換柱或親水作用液相色譜（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography, HILIC）柱。
流動(dòng)相選擇：根據(jù)色譜柱類型和待分析糖類的極性選擇合適的流動(dòng)相，如水、甲醇、乙腈等，可能需要添加酸或鹽來(lái)調(diào)節(jié)pH和離子強(qiáng)度。
檢測(cè)器選擇：HPLC檢測(cè)糖類時(shí)，常用的檢測(cè)器包括示差折光檢測(cè)器（RID）、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）、脈沖安培檢測(cè)器（PAD）和熒光檢測(cè)器等，其中RID和ELSD適用于多數(shù)糖類的檢測(cè)。
數(shù)據(jù)分析
定性分析：通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間比較，結(jié)合檢測(cè)器的響應(yīng)特性，確定樣品中糖類的種類。
定量分析：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法，使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品建立糖類的響應(yīng)值與濃度的關(guān)系，進(jìn)而計(jì)算樣品中糖類的濃度。
注意事項(xiàng)
梯度洗脫：對(duì)于復(fù)雜樣品中的多種糖類，可能需要使用梯度洗脫程序，以優(yōu)化分離效果。
柱溫和流速：根據(jù)分析需求調(diào)整柱溫和流速，以獲得最佳的分離和檢測(cè)條件。
重復(fù)性和穩(wěn)定性：確保分析條件的重復(fù)性和色譜柱的穩(wěn)定性，以獲得可靠的數(shù)據(jù)。
樣本要求
采集的樣品，均應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行分析檢測(cè)，如不能及時(shí)分析檢測(cè)的則需要進(jìn)行處理和保存，一般應(yīng)遵循的原則是：環(huán)境干燥、溫度較低、避免光照、密封保存。
鮮樣：取樣后立即放入用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管（提前進(jìn)行編號(hào)）并放入液氮速凍，-80℃超低溫冰箱保存，足量干冰郵寄運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
烘干樣：取樣后用柔軟濕布擦凈，不應(yīng)用水沖洗。盡快晾干并將樣品置于105 ℃的烘箱中烘 15min以終止樣品中酶的活動(dòng)。經(jīng)過(guò)殺青之后，應(yīng)立即降低烘箱的溫度，維持在70 ～80℃，直到烘至恒重。若測(cè)定樣品中金屬元素的含量，應(yīng)注意金屬器械的污染問(wèn)題，以防干擾。
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取樣前，請(qǐng)與業(yè)務(wù)經(jīng)理溝通您的檢測(cè)需求，確認(rèn)樣品類型以及寄樣方式，以免影響檢測(cè)數(shù)據(jù)的真實(shí)性，造成時(shí)間及成本的損失！
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